Дон Амичи начинал карьеру, играя в водевилях, но его выгнали из труппы за неуклюжесть. Однако эта неудача не убила в нем желания стать актером и уверенности в себе. В 1935 году он дебютировал в кино, а к концу десятилетия стал одним из ведущих актёров Голливуда. Сыграв в картине «Грехи человека» в 1936, Амичи не сходил с экранов. Он снялся в главной роли в «Ромуле» на студии «ХХ век Фокс», фильмах «Одна на миллион», «В старом Чикаго», «Три мушкетёра» и «История Александра Грэхема Белла». Огромным успехом стала роль в ставшей культовой картине «Небеса могут подождать» в 1943 году. Помимо съемок, он выступал на радио, играл на театральной сцене, был частым гостем на телевидении.
За роль в фильме «Кокон» 1985 года уже заслуженный актер был удостоен премии «Оскар». В преклонном возрасте все больше занимался озвучиванием.
Дон Амичи умер от рака простаты в возрасте 85 лет.